叙利亚沙漠中，女吸血鬼丹尼卡（Parker Posey 饰）带领一队同类，深入古老的沙漠宫殿，意欲唤醒沉睡的吸血鬼之王——德雷克（Dominic Purcell 饰）。夜色中，刀锋（韦斯利•斯奈普斯 Wesley Snipes 饰）仍然与吸血鬼们进行着无休止的战斗，但他很快落入了丹尼卡的圈套，误杀了一名人类，因此被FBI探员威尔逊等人抓捕。与此同时，刀锋的老搭档惠斯勒之女阿比盖尔（Jessica Biel 饰）同汉尼拔金（Ryan Reynolds 饰）等年轻人秉持与刀锋相近的信念，组成了一支以自身为诱饵来消灭吸血鬼的队伍，他们将刀锋从FBI和丹尼卡手中救出，但后者对他们的胆大妄为嗤之以鼻，然而面对强大的吸血鬼王德雷克，他们不得不并肩作战……

自从阿伯拉罕（Kris Kristofferson 饰）被吸血鬼带走，日行者刀锋（韦斯利•斯奈普斯 Wesley Snipes 饰）就没有停止寻找这位父亲一样的老搭档，并终于在东欧将其救出。阿伯拉罕缺席的日子里，刀锋依靠新伙伴斯加德担任后勤支持。 不久吸血鬼长老派人传递停战协议，只因吸血鬼中出现了新的变种——收割者，收割者同时以人类和吸血鬼为食，而且由于过快的新陈代谢导致他们需求惊人。刀锋为保全人类同意带领由长老之女内纱（Leonor Varela 饰）、雪人（甄子丹 饰）等组成的吸血鬼血帮部队，消灭收割者，但岂料这一切是吸血鬼的阴谋……

刀锋战士布莱德的母亲怀孕时被吸血鬼咬伤了，生下他后就去世了，由此布莱德（韦斯利•斯奈普斯 Wesley Snipes 饰）带上了一半吸血鬼的血。布莱德自幼在武器专家阿伯拉罕家长大，阿伯拉罕（克里斯•克里斯托佛森 Kris Kristofferson 饰）为他打造威力最强大的对付吸血鬼的武器和为他注射药物以免他变为吸血鬼。 布莱德一直是人类保护神，吸血鬼的克星。当他一次次破坏吸血鬼的好事，猎杀无数吸血鬼后，吸血鬼王佛斯特（斯蒂芬•多尔夫 Stephen Dorff 饰）发誓要除掉这个心头大患。他先是劝说布莱德加入他们的行列，这样的话他们就天下无敌。然后设计弄到布莱德的血，因为这样他就能用他的血实施血祭，唤出血潮，这样所有的人就都会变为吸血鬼。布莱德最终能战胜这个强敌吗？